【课程大纲】

什么是微生物检验员？

微生物检验员怎么获取？企业怎么获取微生物检验员证书？

1．取经37℃培养18-24小时，金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌、铜绿假单胞菌 10104肉汤培养物、 生孢梭菌 64941硫乙醇酸盐培养物1ml+9ml盐水10倍稀释至10-5 ~10-7为50~100个/ml，做活菌计数备用 2．取经25℃ 培养18~24小时的白色念珠菌霉菌液体培养物1ml+9 ml盐水10倍稀释至10-5 ~10-6为50~100个/ml，做活菌计数备用 3．取经25℃ 培养1周的黑曲霉菌斜面培养物，加3~5ml盐水洗下霉菌孢子，吸取出菌液， 用标准比浊管比浊，与浊度相当后，取1 ml +9 ml盐水=10-1，逐管10倍稀释为10-4约50~100个/ ml，做活菌计数备用

结果判断：供试品组的菌回收率、稀释剂对照组的菌回收率。 试验组的菌回收率=[（试验组平均菌落数–供试品对照组平均菌落数）/菌液组平均菌落数 ]×100% 稀释剂对照组的菌回收率=[（稀释剂对照组的平均菌落数/菌液组的平均菌落数）]×100% ●判断标准: 菌回收率均不低70% 。

试验菌株：按规定检查的控制菌选择相应验证的菌株。 ●阴性对照菌株:设立阴性对照菌是为了验证该控制菌检查方法的专属性。金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、梭菌用大肠埃希菌；大肠埃希菌、沙门菌、大肠菌群用金黄色葡萄球菌。 ●菌种的要求：不得超过5代。采用适宜的方法保存。 ●菌液制备:10～100cfu/ml。

一、微生物检验员证书颁发：

CCAA。

二、微生物检验员证书培训费用：

1480元，费用包含：培训费、资料费、证书费、快递费、发票。

.水样的采集与处理 ：(1)无菌操作，以防杂菌混入 采样前盛水容器必须洗刷干净，进行高温高压灭菌。 (2)采集自来水样时，清洁布将水龙头拭干，灼烧水龙头灭菌，完全打开水龙头防水5-10min后关小，采集水样。经常取水的水龙头防水1-3min即可取样。 (3)采集江、河、湖、水库等地面水样时，一般在居民取水点采样；流动水区应采集靠岸边及水流中心的水；水下10-15cm，井水50cm处。

(4)采集经氯处理的水样（如自来水、游泳池）时，需要对样品除氯。在采样前加入除氯剂（每500mL水样中加入硫代硫酸钠0.03g）除去残留的氯，避免剩余氯对水样中细菌的杀害作用，影响结果的真实性。 (5)水样采集后，应在尽快运送到实验室（ 2h内）。如路途较远，应连同水样瓶置于6-10℃的冰瓶内运送，时间不得超过6h，洁净的水不得超过12h，否则将水样暂存与冰箱中（温度低于4 ℃ ）。 (6)运送水样时应避免玻璃瓶摇动，水样溢出后流回瓶中，会增加污染。 (7)检验前应将水样摇晃5-10min。

三、微生物检验员证书培训内容

1.检验的化学基础;

2.实验室安全知识;

3.实验室常用仪器讲解;

4.检验技术及微生物检验技术，大肠杆菌，菌落总数，无菌、药典、霉菌、酵母菌、金色葡萄球菌，志贺氏菌、溶血性链球菌、绿脓杆菌等菌种的实操视频。

四、微生物检验员证书培训相关

（一） 检验前准备 ：(1)准备好所需的各种仪器 如冰箱、恒温水浴箱、显微镜等。 (2)各种玻璃仪器 如吸管、平皿、广口瓶、试管等均需刷洗干净(121℃，20min)或干法(160℃一170℃，2h)灭菌，冷却后送无菌室备用。 (3)准备好实验所需的各种试剂、药品 做好普通琼脂培养基或其他选择性培养基，根据需要分装试管或灭菌后倾注平板或保存在46℃的水浴中或保存在4℃的冰箱中备用。

(4)无菌室灭菌 如用紫外灯法灭菌，时间不应少于45min，关灯半小时后方可进入工作；如用超净工作台，需提前半小时开机。必要时进行无菌室的空气检验，把琼脂平板暴露在空气中15min，培养后每个平板上不得超过15个菌落。 (5)检验人员的工作衣、帽、鞋、口罩等灭菌后备用 工作人员进入无菌室后．实验没完成前不得随便出入无菌室。

五、微生物检验员证书相关

1、样品的采取和送检 :a、散装或大型包装的乳品
   用灭菌刀、勺取样，在移采另一件样品前，刀、勺清洗灭菌。采样时应注意部位的代表性。每件样品数量不少于200g，放入灭菌容器内及时送检。鲜乳一般不应超过3h，在气温较高或路途较远的情况下应进行冷藏，不得使用任何防腐剂。 
样品的采取和送检 :小型包装的乳品
     应采取整件包装，采样时应注意包装的完整。各种小型包装乳与乳制品，每件样品量为：生奶1瓶或1包；消毒奶1瓶或1包；奶粉1瓶或1包（大包装者200g）；奶油1块（113g）；酸奶1瓶或1罐；炼乳1瓶或1罐；奶酪1个。
c、成批产品
  对成批产品进行质量鉴定时，其采样数量每批以千分之一计算，不足千件者抽取1件。 
、鲜奶、酸奶 无菌操作去掉瓶口的纸罩纸盖，瓶口火焰消毒，以无菌操作吸取25ml检样，放入装有225ml灭菌生理盐水的三角瓶内，振摇均匀（酸乳如有水分析出于表层，应先去除）。 b、炼乳 将瓶或罐先用温水洗净表面，再用点燃酒精棉球消毒瓶或罐的上表面，然后用灭菌的开罐器打开罐（瓶），以无菌操作称取25g（ml）检样，放入装有225ml灭菌生理盐水的三角烧瓶内，振摇均匀。
化验室常用检测设备 ：阿贝折光仪
校正和保养
标尺零点校正：用已知折射率的标准液体，常用纯水；
若光学零件表面有灰尘，可用脱脂棉轻擦，再用洗耳球吹去；
若有油污，可用脱脂棉蘸少许汽油轻擦后再用乙醚擦干净；
用完后将仪器放入有干燥剂的箱内，放置于干燥、空气流通的室内，防止仪器受潮；
搬动仪器时应避免强烈振动和撞击，防止光学零件损伤而影响精度。

校准 用蒸馏水清洗电极，配好缓冲溶液（或购买）。 用洁净的滤纸吸去电极上面附着的水（注意不能擦拭）。 然后将电极放入PH=7的标准缓冲溶液中，将功能选择开关拨到"TEMP"处，旋转温度补偿器旋钮调整温度值与被测溶液温度相同。 将功能选择开关拨到"PH"位，调节"定位"电位器，使显示值与PH=7标准缓冲液当前温度下的标准值一致（PH=7）。 取出电极，用蒸馏水清洗电极，用洁净的滤纸吸去电极上的水，再放入PH=4的标准缓冲溶液中，调节"斜率"电位器使显示值与PH=4标准溶液在当前温度下的标准值一致(PH=4)。 如需要提高定位精度，可反复进行上述标定步骤2-3次，直到显示值符合两个标准缓冲溶液PH值为止。经标定后的"定位"，"斜率"电位器不得再变动。

未知溶液的测定 仪器标定后，可进行未知溶液PH值的测量。 将电极用蒸馏水清洗干净，用滤纸吸去电极上的水。 将电极放入待测溶液，显示的值为未知溶液的PH值。 如果测量时的溶液温度与标定温度不一致，则需要重新进行温度补偿设置，使设置温度与测量时溶液温度相同，斜率和定位器按钮不必再变动。 测量完毕后用清水洗电极，而后关闭电源，套上电极帽。

微生物检验员证书



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【讲师介绍】

微生物检验员
食品化学微生物实验室
医疗器械行业申请GMP
化妆品行业

【培训对象】

微生物检验员
食品化学微生物实验室
医疗器械行业申请GMP
化妆品行业

更新时间：2024/3/18 13:49:04