【课程大纲】

什么是微生物检验员？

微生物检验员怎么获取？企业怎么获取微生物检验员证书？

样品保存 :检验报告发出后，阴性样品可及时处理； 阳性样品要待报告发出后3d方能处理(特殊情况可适当延长)； 进口食品的阳性样品，需保存6个月，方能处理。

致病菌检验参考菌群的选择 :蛋及蛋制品：沙门氏菌、葡萄球菌、变形杆菌等 水产品海产品：链球菌、副溶血性弧菌 乳制品：沙门氏菌、志贺氏菌、葡萄球菌、链球菌、蜡样芽胞杆菌 畜禽肉类：肠道致病菌和致病性球菌 米面类：蜡样芽胞杆菌、变形杆菌、酵母霉菌等 罐头：耐热性芽胞杆菌、嗜热脂肪杆菌、大芽胞杆菌、凝值芽胞杆菌

一、微生物检验员证书颁发：

CCAA。

二、微生物检验员证书培训费用：

1480元，费用包含：培训费、资料费、证书费、快递费、发票。

检验方法：一般只检验水中的菌落总数和大肠杆菌近似数（MPN），以此来判断水的卫生质量。 水中菌落总数的测定：GB/T 4789.2 水中大肠菌群的测定: GB/T 4789.2 发酵法：适用广，但操作繁琐，时间长。 滤膜法：仅适用于自来水和深井水，操作简单快速，但不适用杂质太多和易阻塞滤孔的水样。

空气样品的采集与处理：意义：空气作为人类、畜禽传播疾病的主要媒介之一，测定其微生物的种类与数量，对保证食品安全以及预防某些传染病尤为重要。

空气中微生物指标。 常存在于口腔和鼻腔中的链球菌，通常以每立方米中菌落总数或链球菌数的多少来表示（表1-2，室内空气的卫生标准）。 大肠杆菌与魏氏梭菌——空气被粪便的尘土污染； 变形杆菌——空气被各种腐败物质的分解物污染； 需氧芽孢杆菌——空气被尘土污染。

空气样品的采集与处理 采样方法有直接沉降法、过滤法和气流撞击法。 气流撞击法最完善，其能较为准确的表示空气中细菌的真正含量。 气流撞击法需特殊仪器有布尔吉利翁失仪器和克罗托夫氏仪等。

三、微生物检验员证书培训内容

1.检验的化学基础;

2.实验室安全知识;

3.实验室常用仪器讲解;

4.检验技术及微生物检验技术，大肠杆菌，菌落总数，无菌、药典、霉菌、酵母菌、金色葡萄球菌，志贺氏菌、溶血性链球菌、绿脓杆菌等菌种的实操视频。

四、微生物检验员证书培训相关

样品的保存:样品到实验室后应在36h内检验（贝类是6h）。 进行必要和清晰的标识：样品名称、样品描述、样品批号、企业名称和地址、取样人、时间、地点、温度和测试目的。 样品在保存过程中采用适当的方法，取保样品和微生物的状态，仍能代表取样时的特性。（特别需要注意温度、pH值、氧气等条件变化） 对样品的贮存过程应有记录。

样品的处理方法 :是指对采取的样品的分取、粉碎及混匀等过程，以保证样品的均匀性，在检验时能具有代表性。 液体样品 固体样品 冷冻样品

液体样品的处理:1.瓶装液体样品的处理 2.盒装或软塑料包装样品的处理 3.半固体或粘性液体食品

瓶装液体样品的处理 :先摇匀-表面消毒-用无菌工具开罐-吸样（>2.5cm深度） 用点燃的酒精棉球灼烧瓶口灭菌，接着用石炭酸或来苏尔消毒后的纱布盖好，再用灭菌开瓶器将盖启开； 含有二氧化碳的样品可倒入500mL磨口瓶内，口勿盖紧，覆盖一灭菌纱布，轻轻摇荡，待气体全部逸出后，取样25mL检验； 酸性饮料：pH<4.5 用灭菌的10%Na2CO3调至中性。

2.盒装或软塑料包装样品的处理: 将其开口处用75%酒精棉擦拭消毒，用灭菌剪子剪开包装，覆盖上灭菌纱布或浸有消毒液的纱布在剪开部分，直接吸取样品25mL ，或倾入另一灭菌容器中再取样25mL检验。

五、微生物检验员证书相关

修订的检查法 大肠埃希菌检查法、铜绿假单胞菌检查法、 沙门菌检查法、金黄色葡萄球菌检查法。 ●新增的检查法 大肠菌群检查法（近期、远期污染）、梭菌检查法检查法。 供试品的控制菌检查应按已验证的方法进行，增菌培养基的实际用量同控制菌检查方法的验证。验证的目的: 确认所采用的方法适合于供试品的微生物限度检查。 ● 验证的意义：保证检验结果的准确、可靠及检验方法的完整性。

验证的目的: 确认所采用的方法适合于供试品的微生物限度检查。 ● 验证的意义：保证检验结果的准确、可靠及检验方法的完整性。

验证的必要性 理论上要求、试验结果要求 ● 验证的内容 准确性(回收率)、专属性

前验证: 建立药品的微生物限度检查法时. ▲ 再验证: 修订的检验方法;供试品的组分或原检验条件发生改变可能影响检验结果时 ;定期的方法验证.

验证用菌株：大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠 菌、黑曲霉、枯草杆菌。 ●菌株选择的原则:代表性,普遍性,低或非致病性,标准 菌株(或该药品中常见的污染菌)。 ●菌种的要求：不得超过5代。采用适宜的方法保存。 ●菌液制备:50～100cfu/ml。

样品的送检 ：采集好的样品及时送到检验室。 一般不超过3h；路途要遥远时，不需冷冻的样品置于1-5 ℃环境中，切勿冻结；需保持冷冻状态的样品保存于泡沫塑料隔热箱内，防止反复冷冻和溶解

2. 样品送检时认真填写申请单，供检测人员参考。

3. 拿到送检单后，检验人员应立即登记，填写序号，并按要求将样品置于冰箱或冰盒中。

4. 微生物检验室必须备有专用冰箱存放样品。

一般阳性样品存放3d；进口阳性样品存放6个月；阴性样品及时处理。

校准 用蒸馏水清洗电极，配好缓冲溶液（或购买）。 用洁净的滤纸吸去电极上面附着的水（注意不能擦拭）。 然后将电极放入PH=7的标准缓冲溶液中，将功能选择开关拨到"TEMP"处，旋转温度补偿器旋钮调整温度值与被测溶液温度相同。 将功能选择开关拨到"PH"位，调节"定位"电位器，使显示值与PH=7标准缓冲液当前温度下的标准值一致（PH=7）。 取出电极，用蒸馏水清洗电极，用洁净的滤纸吸去电极上的水，再放入PH=4的标准缓冲溶液中，调节"斜率"电位器使显示值与PH=4标准溶液在当前温度下的标准值一致(PH=4)。 如需要提高定位精度，可反复进行上述标定步骤2-3次，直到显示值符合两个标准缓冲溶液PH值为止。经标定后的"定位"，"斜率"电位器不得再变动。

未知溶液的测定 仪器标定后，可进行未知溶液PH值的测量。 将电极用蒸馏水清洗干净，用滤纸吸去电极上的水。 将电极放入待测溶液，显示的值为未知溶液的PH值。 如果测量时的溶液温度与标定温度不一致，则需要重新进行温度补偿设置，使设置温度与测量时溶液温度相同，斜率和定位器按钮不必再变动。 测量完毕后用清水洗电极，而后关闭电源，套上电极帽。

微生物检验员证书



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【讲师介绍】

微生物检验员
食品化学微生物实验室
医疗器械行业申请GMP
化妆品行业

【培训对象】

1.企业主管食品质量、安全标准及监督管理工作岗位的人员、食品生产企业、经销单位、质量监督部门、卫生检验部门及有关科研、管理部门的管理人员、技术人员和检验人员。

更新时间：2024/3/19 10:03:02