【课程大纲】

什么是微生物检验员？

微生物检验员怎么获取？企业怎么获取微生物检验员证书？

检验方法：一般只检验水中的菌落总数和大肠杆菌近似数（MPN），以此来判断水的卫生质量。 水中菌落总数的测定：GB/T 4789.2 水中大肠菌群的测定: GB/T 4789.2 发酵法：适用广，但操作繁琐，时间长。 滤膜法：仅适用于自来水和深井水，操作简单快速，但不适用杂质太多和易阻塞滤孔的水样。

空气样品的采集与处理：意义：空气作为人类、畜禽传播疾病的主要媒介之一，测定其微生物的种类与数量，对保证食品安全以及预防某些传染病尤为重要。

空气中微生物指标。 常存在于口腔和鼻腔中的链球菌，通常以每立方米中菌落总数或链球菌数的多少来表示（表1-2，室内空气的卫生标准）。 大肠杆菌与魏氏梭菌——空气被粪便的尘土污染； 变形杆菌——空气被各种腐败物质的分解物污染； 需氧芽孢杆菌——空气被尘土污染。

空气样品的采集与处理 采样方法有直接沉降法、过滤法和气流撞击法。 气流撞击法最完善，其能较为准确的表示空气中细菌的真正含量。 气流撞击法需特殊仪器有布尔吉利翁失仪器和克罗托夫氏仪等。

一、微生物检验员证书颁发：

CCAA。

二、微生物检验员证书培训费用：

1480元，费用包含：培训费、资料费、证书费、快递费、发票。

无菌检查：注射剂、植入剂、冲洗剂。 无菌检查及微生物限度检查：软膏剂、眼用制剂、气雾 剂 、喷雾剂、散剂、耳用制剂、鼻用制剂、凝胶剂 、 乳膏剂 。 微生物限度检查：粉雾剂、口服溶液剂、口服混悬剂 、口服乳剂、搽剂、洗剂、局部用片剂、酊剂、栓剂、糖浆剂、膜剂、贴剂 、灌肠剂 、糊剂 、涂剂、涂膜剂 。 原则性要求：丸剂、口服片剂、胶囊剂、颗粒剂。

无菌检查：注射剂。 无菌检查及微生物限度检查：散剂、软膏剂、眼用制剂、鼻用制剂、气雾剂、喷雾剂。 微生物限度检查：丸剂、颗粒剂、片剂、锭剂、煎膏 剂、胶剂、糖浆剂、合剂、滴丸剂、胶囊剂、酒剂、 酊剂、流浸膏剂、浸膏剂、露剂、茶剂、栓剂、贴膏 剂(贴剂)、凝胶剂、搽剂、洗剂、涂膜剂. 不要求：膏药。

无菌检查：注射剂、外用溶液剂、灌洗剂。 微生物限度检查：片剂、栓剂、胶囊剂、散剂、颗粒剂、气雾剂。 无菌检查或微生物限度检查：软膏剂、乳膏剂、凝胶剂、喷雾剂、眼用制剂、鼻用制剂。

辅料：乳糖、淀粉、糊精、玉米朊、精制玉米油等。 纯化水：微生物限度 取本品，采用薄膜过滤法处理后，依法检查（附录Ⅺ J），细菌、霉菌和酵母菌总数每1ml不得过100个。 注射用水：微生物限度 取本品至少200ml，采用薄膜过滤法处理后，依法检查（附录Ⅺ J），细菌、霉菌和酵母菌总数每100ml不得过10个。

三、微生物检验员证书培训内容

1.检验的化学基础;

2.实验室安全知识;

3.实验室常用仪器讲解;

4.检验技术及微生物检验技术，大肠杆菌，菌落总数，无菌、药典、霉菌、酵母菌、金色葡萄球菌，志贺氏菌、溶血性链球菌、绿脓杆菌等菌种的实操视频。

四、微生物检验员证书培训相关

洗涤方法 洗涤玻璃仪器的方法很多，应根据试验的要求、污物的性质和污染的程度来选用。 需准确量取溶液的量器，清洗时不易使用毛刷，因长时间使用毛刷，容易磨损量器内壁，使量取的物质不准确。 玻璃器皿洁净度检查：内壁应完全被水润湿而不挂水珠

清洗方法： 用水刷洗 用合成洗涤剂洗或肥皂液洗 用铬酸洗液（20g重铬酸钾溶于加热搅拌的40g水中，再慢慢加入360g工业浓盐酸）：对有机物的油污去处能力强，但其腐蚀性强、有一定毒性，使用应注意安全。 其他洗涤液 碱性高锰酸钾洗液：4g高锰酸钾溶于水中，加入10g氢氧化钾，用水稀释 至100ml。用于清洗油污或其它有机物质。 草酸洗液：5-10g草酸溶于100ml水中，加入少量浓盐酸。此溶液用于洗涤高锰酸钾洗后产生的二氧化锰。 碘－碘化钾洗液（1g碘和2g碘化钾溶于水，用水稀释至100ml）：用于洗涤硝酸银黑褐色残留污物。 纯酸洗液：1:1的盐酸或硝酸。用于除去微量离子。 碱性洗液：10％氢氧化钠水溶液。加热使用去油效果较好。 有机溶剂（乙醚、乙醇、苯、丙酮）：用于洗去油污或溶于该溶剂的有机物。

干燥 晾干：不急用的可倒置自然干燥。 烘干：可用105-120℃烘箱烘干（量器不可在烘箱烘干）。 吹干：急于干燥的可用热风吹干（玻璃仪器烘干机）。

五、微生物检验员证书相关

b、禽类（包括家禽和野禽） 鲜、冻家禽采取整只，放无菌容器内；带毛野禽可放清洁容器内，立即送检。 c、各类熟肉制品 包括酱卤肉、肴肉、方圆腿、熟灌肠、熏烤肉、肉松、肉脯、肉干等，一般采取200g，熟禽采取整只，均放无菌容器内，立即送检。 d、腊肠、香肚等生灌肠 采取整根、整只，小型的可采数根、数只，其总量不少于250g。

检样的处理 a、生肉及脏器检样的处理 先将检样进行表面消毒（在沸水内烫3s~5s，或灼烧消毒），再用无菌剪剪取检样深层肌肉25g，放入无菌乳钵内用灭菌剪剪碎后，加灭菌海砂或玻璃砂或玻璃砂研磨，磨碎后加入灭菌水225mL，混匀后即为1:10稀释液。 b、鲜、冻家禽检样的处理 先将检样进行表面消毒，用灭菌剪或刀去皮后，剪取肌肉25g（一般可从胸部或腿部剪取），以下处理同生肉。带毛野禽去毛后，同家禽检样处理。

棉拭采样法和检样处理 一般用板孔5cm2的金属制规板，压在受检物上，将灭菌棉拭稍沾湿，在板孔5cm2的范围内揩抹多次，然后将板孔规板移压另一点，用另一棉拭揩抹，如此共移压揩抹10次，总面积50cm2。每支棉拭在揩抹完毕后立即剪断或烧断后投入盛50ml灭菌水的三角瓶或大试管中，立即送检。检验时充分振摇瓶、管中液体，作为原液，再作10倍递增稀释。 检验致病菌，不必用规板，在可疑部位用棉拭揩抹即可。 4、检验方法 见菌落总数、大肠菌群测定及有关致病菌和霉菌的检验。

（一） 检验前准备 ：(1)准备好所需的各种仪器 如冰箱、恒温水浴箱、显微镜等。 (2)各种玻璃仪器 如吸管、平皿、广口瓶、试管等均需刷洗干净(121℃，20min)或干法(160℃一170℃，2h)灭菌，冷却后送无菌室备用。 (3)准备好实验所需的各种试剂、药品 做好普通琼脂培养基或其他选择性培养基，根据需要分装试管或灭菌后倾注平板或保存在46℃的水浴中或保存在4℃的冰箱中备用。

(4)无菌室灭菌 如用紫外灯法灭菌，时间不应少于45min，关灯半小时后方可进入工作；如用超净工作台，需提前半小时开机。必要时进行无菌室的空气检验，把琼脂平板暴露在空气中15min，培养后每个平板上不得超过15个菌落。 (5)检验人员的工作衣、帽、鞋、口罩等灭菌后备用 工作人员进入无菌室后．实验没完成前不得随便出入无菌室。

1、瓶装液体样品的处理 :用点燃的酒精棉球灼烧瓶口灭菌，接着用石炭酸或来苏尔消毒后的纱布盖好，再用灭菌开瓶器将盖启开； 含有二氧化碳的样品可倒入500mL磨口瓶内，口勿盖紧，覆盖一灭菌纱布，轻轻摇荡，待气体全部逸出后，取样25mL检验。

2、盒装或软塑料包装样品的处理 :将其开口处用75%酒精棉擦拭消毒，用灭菌剪子剪开包装，覆盖上灭菌纱布或浸有消毒液的纱布在剪开部分，直接吸取样品25mL ，或倾入另一灭菌容器中再取样25mL检验。

固体样品的处理：1、捣碎均质法 ;将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g放入带225mL稀释液的无菌均质杯中，8000~10000r/min均质1~2min即可。

剪碎振摇法:将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g检样进一步剪碎，放入带225mL稀释液和直径5mm左右玻璃珠的稀释瓶中，盖紧瓶盖，用力快速振摇50次，振幅要大于40cm。

研磨法 :将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g检样放入无菌乳钵中充分研磨后，再放入带有225mL无菌稀释液的稀释瓶中，盖紧盖后充分摇匀。

整粒振摇法 :直接称取25g整粒样品置于带有225mL稀释液和直径5mm左右玻璃珠的稀释瓶中，盖紧瓶盖，用力快速振摇50次，振幅要大于40cm。

微生物检验员证书



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【讲师介绍】

微生物检验员
食品化学微生物实验室
医疗器械行业申请GMP
化妆品行业

【培训对象】

1.企业主管食品质量、安全标准及监督管理工作岗位的人员、食品生产企业、经销单位、质量监督部门、卫生检验部门及有关科研、管理部门的管理人员、技术人员和检验人员。

更新时间：2024/3/21 8:48:49