【课程大纲】

什么是微生物检验员？

微生物检验员怎么获取？企业怎么获取微生物检验员证书？

修订的检查法 大肠埃希菌检查法、铜绿假单胞菌检查法、 沙门菌检查法、金黄色葡萄球菌检查法。 ●新增的检查法 大肠菌群检查法（近期、远期污染）、梭菌检查法检查法。 供试品的控制菌检查应按已验证的方法进行，增菌培养基的实际用量同控制菌检查方法的验证。验证的目的: 确认所采用的方法适合于供试品的微生物限度检查。 ● 验证的意义：保证检验结果的准确、可靠及检验方法的完整性。

验证的目的: 确认所采用的方法适合于供试品的微生物限度检查。 ● 验证的意义：保证检验结果的准确、可靠及检验方法的完整性。

验证的必要性 理论上要求、试验结果要求 ● 验证的内容 准确性(回收率)、专属性

前验证: 建立药品的微生物限度检查法时. ▲ 再验证: 修订的检验方法;供试品的组分或原检验条件发生改变可能影响检验结果时 ;定期的方法验证.

验证用菌株：大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠 菌、黑曲霉、枯草杆菌。 ●菌株选择的原则:代表性,普遍性,低或非致病性,标准 菌株(或该药品中常见的污染菌)。 ●菌种的要求：不得超过5代。采用适宜的方法保存。 ●菌液制备:50～100cfu/ml。

一、微生物检验员证书颁发：

CCAA。

二、微生物检验员证书培训费用：

1480元，费用包含：培训费、资料费、证书费、快递费、发票。

采样的要求 ：1、严格遵守样品采集的操作规程。
2、所采样品必须具有代表性。
3、采样操作要防止污染，防止变质、损坏、丢失。
4、不得加入防腐剂、固定剂等。  
5、样品采集和现场测定必须有二人以上参加 。

食品微生物检验的采样方法
国际食品微生物规格委员会（ICMSF）取样方案；
美国食品和药物管理局（FDA）的取样方案；
世界粮农组织（FAO）取样方案；
我国的食品取样方案。
原则： 能采取完整包装的样品就不拆开取样，必须拆开包装取样的应按无菌操作进行取样.
)液体样品采样方法
生产工序监测采样：车间空气采样：将5个直径90mm的普通琼脂平板分别置于车间的四角和中部，打开平皿盖5min，然后盖盖送检。

食物中毒微生物检验的取样
可疑中毒源食品餐具
病人的呕吐物
粪便或血液
粪便或血液
人畜共患病原微生物检验的取样

当怀疑某一动物产品可能带来人畜共患病病原体时，应结合畜禽传染病学的基础知识，采取病原体最集中、最易检出的组织或体液送检验室检验。


三、微生物检验员证书培训内容

1.检验的化学基础;

2.实验室安全知识;

3.实验室常用仪器讲解;

4.检验技术及微生物检验技术，大肠杆菌，菌落总数，无菌、药典、霉菌、酵母菌、金色葡萄球菌，志贺氏菌、溶血性链球菌、绿脓杆菌等菌种的实操视频。

四、微生物检验员证书培训相关

食品微生物学检验的指标 ：食品微生物学检验的指标：细菌菌落总数是反映食品的新鲜度、被细菌污染的程度及在加工过程中细菌繁殖动态的一项指标，是判断食品卫生质量的重要依据。 
2．大肠菌群数：大肠菌群是肠道中普遍存在且数量最多的一群细菌，常将其作为人畜粪便污染的指标，也是评价食品卫生质量的重要依据。
3．致病菌：致病菌的种类繁多、特性各异，一般根据不同食品或不同场合选择不同的致病菌进行检验。
  当某种病流行时，则有必要选检引起该病的病原菌
4、有些霉菌也会产生毒素，从而引起疾病，故也要根据具体情况对霉菌进行检验，  如：黄曲霉菌代谢产生的
黄曲霉毒素能诱发肝癌。







五、微生物检验员证书相关

样品的种类
大样： 就是一整批；
中样： 是从样品中各部分取得的混合样品，  
        一般为200g；
小样： 也称检样，做分析用的，一般为25g。
采样原则：
根据检验目的设计科学的取样和样品制备方案： 取样方案主要取决于检验的目的，目的不同，取样方案也不同。 在采样过程中，对各种影响因素要考虑周全,要防止样 品受到外界污染，还要防止样品变质和有细菌生长。

采样的步骤 ：采样前调查→现场观察→确定采样方案→采样 →样品封存 →开具采样证明

检验方法：一般只检验水中的菌落总数和大肠杆菌近似数（MPN），以此来判断水的卫生质量。 水中菌落总数的测定：GB/T 4789.2 水中大肠菌群的测定: GB/T 4789.2 发酵法：适用广，但操作繁琐，时间长。 滤膜法：仅适用于自来水和深井水，操作简单快速，但不适用杂质太多和易阻塞滤孔的水样。

空气样品的采集与处理：意义：空气作为人类、畜禽传播疾病的主要媒介之一，测定其微生物的种类与数量，对保证食品安全以及预防某些传染病尤为重要。

空气中微生物指标。 常存在于口腔和鼻腔中的链球菌，通常以每立方米中菌落总数或链球菌数的多少来表示（表1-2，室内空气的卫生标准）。 大肠杆菌与魏氏梭菌——空气被粪便的尘土污染； 变形杆菌——空气被各种腐败物质的分解物污染； 需氧芽孢杆菌——空气被尘土污染。

空气样品的采集与处理 采样方法有直接沉降法、过滤法和气流撞击法。 气流撞击法最完善，其能较为准确的表示空气中细菌的真正含量。 气流撞击法需特殊仪器有布尔吉利翁失仪器和克罗托夫氏仪等。

奶油 无菌操作打开包装，取适量检样于灭菌三角烧瓶内，450C水浴或温箱中加温溶解，用灭菌吸管取25mL奶油放入含225ml灭菌生理盐水或灭菌奶油稀释液的烧瓶（瓶装稀释液应预置于450C水浴中保温，10倍递增稀释时所用稀释液亦同），振摇均匀，从检样融化到接种完毕时间不应超过30min。 注：奶油稀释液：格林氏液（配法：氯化钠9g、氯化钾0.12g、氯化钙0.24g、碳酸氢钠0.2g、蒸馏水1000ml）250mL、蒸馏水750ml、琼脂1g、加热溶解，分装每瓶225ml，1210C灭菌15min。

奶粉 罐装奶粉的开罐取样法同炼乳，袋装奶粉应用蘸有75%酒精的棉球涂擦消毒袋口，以无菌操作开封取样，称取检样25g，放入装有适量玻璃珠的灭菌三角烧瓶内，将225ml温热的灭菌生理盐水徐徐加入（先用少量生理盐水将奶粉调成糊状，再全部加入，以免奶粉结块），振摇使充分溶解和混匀。

奶酪 先用灭菌刀削去部分表面封蜡，用点燃的酒精棉球消毒表面，然后用灭菌刀切开奶酪，以无菌操作切取表层和深层检样各少许，置于灭菌乳钵内切碎，加入少量生理盐水研成糊状

微生物检验员证书



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【讲师介绍】

微生物检验员
食品化学微生物实验室
医疗器械行业申请GMP
化妆品行业

【培训对象】

1.企业主管食品质量、安全标准及监督管理工作岗位的人员、食品生产企业、经销单位、质量监督部门、卫生检验部门及有关科研、管理部门的管理人员、技术人员和检验人员。

更新时间：2024/3/26 9:49:54