【课程大纲】

什么是微生物检验员？

微生物检验员怎么获取？企业怎么获取微生物检验员证书？


检验方法：一般只检验水中的菌落总数和大肠杆菌近似数（MPN），以此来判断水的卫生质量。 水中菌落总数的测定：GB/T 4789.2 水中大肠菌群的测定: GB/T 4789.2 发酵法：适用广，但操作繁琐，时间长。 滤膜法：仅适用于自来水和深井水，操作简单快速，但不适用杂质太多和易阻塞滤孔的水样。

空气样品的采集与处理：意义：空气作为人类、畜禽传播疾病的主要媒介之一，测定其微生物的种类与数量，对保证食品安全以及预防某些传染病尤为重要。

空气中微生物指标。 常存在于口腔和鼻腔中的链球菌，通常以每立方米中菌落总数或链球菌数的多少来表示（表1-2，室内空气的卫生标准）。 大肠杆菌与魏氏梭菌——空气被粪便的尘土污染； 变形杆菌——空气被各种腐败物质的分解物污染； 需氧芽孢杆菌——空气被尘土污染。

空气样品的采集与处理 采样方法有直接沉降法、过滤法和气流撞击法。 气流撞击法最完善，其能较为准确的表示空气中细菌的真正含量。 气流撞击法需特殊仪器有布尔吉利翁失仪器和克罗托夫氏仪等。


一、微生物检验员证书颁发：

CCAA。 

二、微生物检验员证书培训费用：

1480元，费用包含：培训费、资料费、证书费、快递费、发票。 


土壤样品的采集与处理 ：通常不做土壤中微生物检测，只在特殊情况下进行。如大批水果罐头受微生物的污染而变质时，为追查原因而对水果产地的土壤进行检验分析等特殊情况。 样品采集的方法：灭菌刀或灭菌铲出去土壤表层，用灼烧过的勺采取200-300g土壤置于无菌容器中，标明采样地点、深度、时间等。 样品处理的方法：土壤置于灭菌的乳钵中研磨均匀，称取50g于500mL无菌水中，充分震荡混匀后制成1:10的稀释液，再根据检验需求进一步稀释，测定指标微生物（如菌落总数、霉菌、酵母菌等）。

食品微生物样品的采集与处理

一）食品微生物检验的取样方案 ：目的不同，取样方案不同。 国内外使用的采样方案多种多样，如国际食品微生物规范委员会（简称ICMSF）是根据事先给食品进行的危害程度划分而确定（表1-3），我国则根据事先对食品类别的划分而确定（表1-4）。


三、微生物检验员证书培训内容

1.检验的化学基础;

2.实验室安全知识;

3.实验室常用仪器讲解;

4.检验技术及微生物检验技术，大肠杆菌，菌落总数，无菌、药典、霉菌、酵母菌、金色葡萄球菌，志贺氏菌、溶血性链球菌、绿脓杆菌等菌种的实操视频。 

四、微生物检验员证书培训相关


b、禽类（包括家禽和野禽） 鲜、冻家禽采取整只，放无菌容器内；带毛野禽可放清洁容器内，立即送检。 c、各类熟肉制品 包括酱卤肉、肴肉、方圆腿、熟灌肠、熏烤肉、肉松、肉脯、肉干等，一般采取200g，熟禽采取整只，均放无菌容器内，立即送检。 d、腊肠、香肚等生灌肠 采取整根、整只，小型的可采数根、数只，其总量不少于250g。

检样的处理 a、生肉及脏器检样的处理 先将检样进行表面消毒（在沸水内烫3s~5s，或灼烧消毒），再用无菌剪剪取检样深层肌肉25g，放入无菌乳钵内用灭菌剪剪碎后，加灭菌海砂或玻璃砂或玻璃砂研磨，磨碎后加入灭菌水225mL，混匀后即为1:10稀释液。 b、鲜、冻家禽检样的处理 先将检样进行表面消毒，用灭菌剪或刀去皮后，剪取肌肉25g（一般可从胸部或腿部剪取），以下处理同生肉。带毛野禽去毛后，同家禽检样处理。

棉拭采样法和检样处理 一般用板孔5cm2的金属制规板，压在受检物上，将灭菌棉拭稍沾湿，在板孔5cm2的范围内揩抹多次，然后将板孔规板移压另一点，用另一棉拭揩抹，如此共移压揩抹10次，总面积50cm2。每支棉拭在揩抹完毕后立即剪断或烧断后投入盛50ml灭菌水的三角瓶或大试管中，立即送检。检验时充分振摇瓶、管中液体，作为原液，再作10倍递增稀释。 检验致病菌，不必用规板，在可疑部位用棉拭揩抹即可。 4、检验方法 见菌落总数、大肠菌群测定及有关致病菌和霉菌的检验。


五、微生物检验员证书相关


容量分析：以被检验的物质在参加化学反应时所消耗的已知标准滴定溶液的体积为基础，来计算该物质的量称为容量法。 中和法：利用酸碱中和反应进行测定的方法。 沉淀法：利用沉淀反应进行测定的方法。 氧化还原法：利用氧化还原反应进行测定的方法。 比色分析：待测元素的离子本身具有颜色，或向被测溶液加入某种试剂溶液后能生成鲜明的颜色，颜色的深浅与待测离子的浓度存在数学关系。

常见试剂的分类： 优级纯（GR） 纯度高，可做基准物质 分析纯（AR） 纯度较高，用于一般分析、科研 化学纯（CP） 工业分析、实验 实验试剂（LR） 用于一般化学实验 建议不用的级别用不同颜色的标签进行识别。

特殊试剂的分类、规格： 基准试剂：用于标定滴定分析标准溶液的标准参考物质。可做为基准物使用，也可精确称量后直接配制标液。含量在99.95-100.05%，杂质含量略低于优级纯或相当。 生物染色剂：配制微生物标本的染色液，BS。 生化试剂： 配制生物化学检验试剂，BR。 光、色谱纯试剂、指示剂、缓冲试剂等，SP、GC、ind。



食品微生物检验采样方法:采样原则： 能采取完整包装的样品就不拆开取样，必须拆开包装取样的应按无菌操作进行取样.

直接食用的小包装食品 :直到检验前不要开封，以防污染

统装或大容器包装的液体食品 :抽样前摇动均质，取样不超过其容量的四分之三，测温，记录，冷却（ 0-4℃ ），取样检测前再混匀一次，用100mL无菌注射器抽取,注入无菌盛样容器。

大块整体食品用无菌刀具和镊子从不同的部位割取，并注意其代表性； 若为检验食品的污染情况，可取表层样品；若为检验食品品质的情况，应从深部取样。 （肉类、鱼类或类似食品要将表面样品和深层样品分开保存，防止交叉污染）

取样时可以用锥子、木钻等获取深层样品。样品一旦融化，不可使其再冻，保持冷却即可。 大包装小块冷冻食品按小块个体采取； 大块冷冻食品可用无菌刀从不同部位削取或用无菌手锯从冻块上锯取样品，放入无菌容器。



蛋白质 消化：样品中的含氮有机物经浓硫酸加热消化，硫酸使有机物脱水，有机物炭化生成C；C将硫酸还原为SO2，本身生成CO2；SO2使N还原为NH3，本身则氧化为SO3，而消化过程中生成的H，又加速了NH3的形成。在反应过程中，生成物水和SO3逸出，NH3则与硫酸结合成硫酸铵，留在溶液中。 蒸馏：硫酸铵在碱性条件下，释放出氨。 吸收和滴定：蒸馏过程中放出的氨用硼酸溶液吸收后，用硫酸标准溶液滴定，根据硫酸标准溶液消耗量计算出总氮量，进而算出蛋白质的含量。

蛋白质 注意事项 先小火加热，无泡沫后再加大火力。 10%的氢氧化钠每用3-4次要更换一次，并检查滤网是否堵塞。 蒸馏前检查水、硼酸、氢氧化钠、硫酸是否够用，加硫酸时试剂瓶内的细管不能拿出液面外，以防空气进入。 蒸馏过程中不能打开仪器门。 清洗完毕后用蒸馏水浸泡电极。 抽滤器空转不得超过5分钟。 消化好后及时蒸馏、滴定。


微生物检验员证书



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【讲师介绍】

微生物检验员
食品化学微生物实验室
医疗器械行业申请GMP
化妆品行业

【培训对象】

1.企业主管食品质量、安全标准及监督管理工作岗位的人员、食品生产企业、经销单位、质量监督部门、卫生检验部门及有关科研、管理部门的管理人员、技术人员和检验人员。

更新时间：2024/3/7 7:02:35