【课程大纲】

什么是微生物检验员？

微生物检验员怎么获取？企业怎么获取微生物检验员证书？


食品微生物检验采样方法:采样原则： 能采取完整包装的样品就不拆开取样，必须拆开包装取样的应按无菌操作进行取样.

直接食用的小包装食品 :直到检验前不要开封，以防污染

统装或大容器包装的液体食品 :抽样前摇动均质，取样不超过其容量的四分之三，测温，记录，冷却（ 0-4℃ ），取样检测前再混匀一次，用100mL无菌注射器抽取,注入无菌盛样容器。

大块整体食品用无菌刀具和镊子从不同的部位割取，并注意其代表性； 若为检验食品的污染情况，可取表层样品；若为检验食品品质的情况，应从深部取样。 （肉类、鱼类或类似食品要将表面样品和深层样品分开保存，防止交叉污染）

取样时可以用锥子、木钻等获取深层样品。样品一旦融化，不可使其再冻，保持冷却即可。 大包装小块冷冻食品按小块个体采取； 大块冷冻食品可用无菌刀从不同部位削取或用无菌手锯从冻块上锯取样品，放入无菌容器。


一、微生物检验员证书颁发：

CCAA。 

二、微生物检验员证书培训费用：

1480元，费用包含：培训费、资料费、证书费、快递费、发票。 


食品微生物检验样品的处理

样品必须于无菌室内处理；需解冻的样品应于原容器中解冻，解冻条件为，2-5 ℃温度下不超多15h或45 ℃温度下不超过15min。

一般固体食品的样品处理方法有一下几种：捣碎均质法：100g样品剪碎混匀，取25g于含225mL稀释液的无菌均质杯，8000-10000r/min均质1-2min。此法适用性广。 剪碎振荡法： 100g样品剪碎混匀，取25g于含225mL稀释液和适量直径5mm玻璃珠的稀释瓶，盖紧瓶盖，用力快速振荡50次，振幅不小于40cm。


三、微生物检验员证书培训内容

1.检验的化学基础;

2.实验室安全知识;

3.实验室常用仪器讲解;

4.检验技术及微生物检验技术，大肠杆菌，菌落总数，无菌、药典、霉菌、酵母菌、金色葡萄球菌，志贺氏菌、溶血性链球菌、绿脓杆菌等菌种的实操视频。 

四、微生物检验员证书培训相关


化验室常用检测设备：手持式折光仪

使用方法
打开手持式折光仪盖板，用干净的纱布或卷纸擦干棱镜玻璃面
在棱镜玻璃面上滴2滴蒸馏水，盖上盖板。于水平状态观察，检查视野中明暗交界线是否处于零刻线上，若与零线不重合，则旋动刻度调节螺旋；
用纱布或卷纸将水擦干，然后如上法在棱镜玻璃面上滴2滴试样，进行观测，读数。


五、微生物检验员证书相关


操作环境 洁净度：微生物限度检查应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内进行。检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。 洁净度定期检测:单向流空气区域、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌、和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。

●细菌培养温度:30～35℃。 ●霉菌、酵母菌培养温度:23（25）～28℃。 控制菌培养温度:35～37℃ ●结果报告：以1g、1ml、10g、10ml 或 10cm2 为单位报告。

抽样量 ：随机抽取不少于检验量（两个以上最小包装单位）的3倍。 ● 检验量：一次试验所用的供试品的量。一般为10g或10ml；中药膜剂50 cm2，化学药膜剂为100cm2；贵重或微量包装的药品酌减（不得少于3g）。 ●检查沙门菌的供试品其检验量改为10g或10ml。从2个包装以上取样。

表面活性剂、中和剂或灭活剂：应证明其有效性及对微生物的生长和存活无影响。 ● 供试液从制备至加入检验用培养基，不得超过1小时。 ● 供试液制备若需用水浴加温时，温度不应超过45℃。 ● 供试液的体积：100ml。

供试品分类 液体供试品 固体、半固体或黏稠液性供试品 需用特殊供试液制备方法的供试品 非水溶性供试品 膜剂供试品 肠溶及结肠溶制剂供试品 气雾剂、喷雾剂供试品 具抑菌活性的供试品



检验方法：一般只检验水中的菌落总数和大肠杆菌近似数（MPN），以此来判断水的卫生质量。 水中菌落总数的测定：GB/T 4789.2 水中大肠菌群的测定: GB/T 4789.2 发酵法：适用广，但操作繁琐，时间长。 滤膜法：仅适用于自来水和深井水，操作简单快速，但不适用杂质太多和易阻塞滤孔的水样。

空气样品的采集与处理：意义：空气作为人类、畜禽传播疾病的主要媒介之一，测定其微生物的种类与数量，对保证食品安全以及预防某些传染病尤为重要。

空气中微生物指标。 常存在于口腔和鼻腔中的链球菌，通常以每立方米中菌落总数或链球菌数的多少来表示（表1-2，室内空气的卫生标准）。 大肠杆菌与魏氏梭菌——空气被粪便的尘土污染； 变形杆菌——空气被各种腐败物质的分解物污染； 需氧芽孢杆菌——空气被尘土污染。

空气样品的采集与处理 采样方法有直接沉降法、过滤法和气流撞击法。 气流撞击法最完善，其能较为准确的表示空气中细菌的真正含量。 气流撞击法需特殊仪器有布尔吉利翁失仪器和克罗托夫氏仪等。



蛋白质 消化：样品中的含氮有机物经浓硫酸加热消化，硫酸使有机物脱水，有机物炭化生成C；C将硫酸还原为SO2，本身生成CO2；SO2使N还原为NH3，本身则氧化为SO3，而消化过程中生成的H，又加速了NH3的形成。在反应过程中，生成物水和SO3逸出，NH3则与硫酸结合成硫酸铵，留在溶液中。 蒸馏：硫酸铵在碱性条件下，释放出氨。 吸收和滴定：蒸馏过程中放出的氨用硼酸溶液吸收后，用硫酸标准溶液滴定，根据硫酸标准溶液消耗量计算出总氮量，进而算出蛋白质的含量。

蛋白质 注意事项 先小火加热，无泡沫后再加大火力。 10%的氢氧化钠每用3-4次要更换一次，并检查滤网是否堵塞。 蒸馏前检查水、硼酸、氢氧化钠、硫酸是否够用，加硫酸时试剂瓶内的细管不能拿出液面外，以防空气进入。 蒸馏过程中不能打开仪器门。 清洗完毕后用蒸馏水浸泡电极。 抽滤器空转不得超过5分钟。 消化好后及时蒸馏、滴定。


微生物检验员证书



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【讲师介绍】

微生物检验员
食品化学微生物实验室
医疗器械行业申请GMP
化妆品行业

【培训对象】

1.企业主管食品质量、安全标准及监督管理工作岗位的人员、食品生产企业、经销单位、质量监督部门、卫生检验部门及有关科研、管理部门的管理人员、技术人员和检验人员。

更新时间：2024/3/12 6:58:15