【课程大纲】

什么是微生物检验员？

微生物检验员怎么获取？企业怎么获取微生物检验员证书？

非水溶性供试品 ：增加"十四烷酸异丙酯法"（如油溶膏剂等） 。 ●结肠溶制剂供试品 ：用pH7.6无菌磷酸盐 缓冲液溶解。 ●气雾剂、喷雾剂供试品：冷冻1小时，放尽抛射剂，药液加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨B.S。 ● 具抑菌活性的供试品：增加方法的可操作 性（细化）。

培养基及稀释剂等灭菌:采用验证合格 的灭菌程序进行灭菌。

稀释剂：pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲溶液（增 加检出率，对被破坏的微生物有复 苏作用） pH6.8无菌磷酸盐缓冲液 pH7.6无菌磷酸盐缓冲液

培养时间:必要时，可适当延长培养时间至5～7天 . ●点计：逐日点计. ●同稀释级两个平板的菌落平均数不小于15时，则两个平板菌落数不能相差1倍或以上。 ●培养基平板上生长特殊菌落：以菌落数高的培养基中的菌数为记数结果。 ●菌数报告规则：（1）、（2）、（3）、（4）。

一、微生物检验员证书颁发：

CCAA。

二、微生物检验员证书培训费用：

1480元，费用包含：培训费、资料费、证书费、快递费、发票。

校准 用蒸馏水清洗电极，配好缓冲溶液（或购买）。 用洁净的滤纸吸去电极上面附着的水（注意不能擦拭）。 然后将电极放入PH=7的标准缓冲溶液中，将功能选择开关拨到"TEMP"处，旋转温度补偿器旋钮调整温度值与被测溶液温度相同。 将功能选择开关拨到"PH"位，调节"定位"电位器，使显示值与PH=7标准缓冲液当前温度下的标准值一致（PH=7）。 取出电极，用蒸馏水清洗电极，用洁净的滤纸吸去电极上的水，再放入PH=4的标准缓冲溶液中，调节"斜率"电位器使显示值与PH=4标准溶液在当前温度下的标准值一致(PH=4)。 如需要提高定位精度，可反复进行上述标定步骤2-3次，直到显示值符合两个标准缓冲溶液PH值为止。经标定后的"定位"，"斜率"电位器不得再变动。

未知溶液的测定 仪器标定后，可进行未知溶液PH值的测量。 将电极用蒸馏水清洗干净，用滤纸吸去电极上的水。 将电极放入待测溶液，显示的值为未知溶液的PH值。 如果测量时的溶液温度与标定温度不一致，则需要重新进行温度补偿设置，使设置温度与测量时溶液温度相同，斜率和定位器按钮不必再变动。 测量完毕后用清水洗电极，而后关闭电源，套上电极帽。

三、微生物检验员证书培训内容

1.检验的化学基础;

2.实验室安全知识;

3.实验室常用仪器讲解;

4.检验技术及微生物检验技术，大肠杆菌，菌落总数，无菌、药典、霉菌、酵母菌、金色葡萄球菌，志贺氏菌、溶血性链球菌、绿脓杆菌等菌种的实操视频。

四、微生物检验员证书培训相关

1．取经37℃培养18-24小时，金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌、铜绿假单胞菌 10104肉汤培养物、 生孢梭菌 64941硫乙醇酸盐培养物1ml+9ml盐水10倍稀释至10-5 ~10-7为50~100个/ml，做活菌计数备用 2．取经25℃ 培养18~24小时的白色念珠菌霉菌液体培养物1ml+9 ml盐水10倍稀释至10-5 ~10-6为50~100个/ml，做活菌计数备用 3．取经25℃ 培养1周的黑曲霉菌斜面培养物，加3~5ml盐水洗下霉菌孢子，吸取出菌液， 用标准比浊管比浊，与浊度相当后，取1 ml +9 ml盐水=10-1，逐管10倍稀释为10-4约50~100个/ ml，做活菌计数备用

结果判断：供试品组的菌回收率、稀释剂对照组的菌回收率。 试验组的菌回收率=[（试验组平均菌落数–供试品对照组平均菌落数）/菌液组平均菌落数 ]×100% 稀释剂对照组的菌回收率=[（稀释剂对照组的平均菌落数/菌液组的平均菌落数）]×100% ●判断标准: 菌回收率均不低70% 。

试验菌株：按规定检查的控制菌选择相应验证的菌株。 ●阴性对照菌株:设立阴性对照菌是为了验证该控制菌检查方法的专属性。金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、梭菌用大肠埃希菌；大肠埃希菌、沙门菌、大肠菌群用金黄色葡萄球菌。 ●菌种的要求：不得超过5代。采用适宜的方法保存。 ●菌液制备:10～100cfu/ml。

五、微生物检验员证书相关

试漏：⑴将酸式滴定管装满蒸馏水，垂直夹在滴定架上，放置5min，观察管尖处是否有水滴滴下，活塞缝隙处是否有水渗出，若不渗，将活塞旋转180°，放置5min，再观察一次。⑵碱式滴定管只需装满蒸馏水，垂直夹在滴定架上，放置5min，观察管尖处是否有水滴滴下即可。 排气：⑴用右手拿酸式滴定管上部无刻度处，滴定管倾斜约30°，左手迅速打开活塞使溶液冲出，如仍有气泡，可重复操作几次，如仍有可能出口管部分没洗干净，需重洗。⑵将碱式滴定管垂直夹在滴定架上，使胶皮管向上弯曲，出口管斜向上，往一旁轻轻捏橡皮管，使溶液从管口喷出，以排出气泡。

操作： 酸式滴定管操作：左手控制活塞，无名指和小指向手心弯曲，轻轻抵住出口管，大拇指在前，食指和中指在后，手指略微弯曲，轻轻向内扣住活塞，手心空握，以防顶出活塞，造成漏液。 碱式滴定管操作：左手拇指在前，食指在后，捏住橡皮管中玻璃珠所在部位稍上的地方，向右方挤橡皮管，使其与玻璃珠之间形成一条缝隙，从而放出溶液。注意不能捏玻璃珠下方的胶皮管，以免当松手时空气进入而形成气泡，也不要用力捏压玻璃珠，容易使玻璃珠上下游走。 滴定时出口管尖处不得有悬液，滴定时滴定管下端伸入瓶口约1cm，滴定结束时出口管嘴上悬液应用三角瓶内壁沾下。 读数：可将滴定管夹在滴定架上，也可从管架上取下，用手拿着滴定管上部无刻度处，两种方法均需使管保持垂直，必须注意初读与终读应采用同一种读数方法。 每次滴定最好都从读数0.00开始。 无色溶液：视线与溶液弯液面的最低点在同一水平线上。 有色溶液：读取液面两侧的最高点。

药品使用安全 药品和试剂要分类存放；有毒的化学药品，要由专人负责保管，对药品的使用及领取做详细记录。 所有药品、试剂要摆放整齐，贴有与内容物相符的标识；严禁将用完的原装试剂空瓶在不更换3标签的情况下，装入其它试剂。时常检查药品瓶上的标签是否清楚，如模糊不清应及时更换标签。 强酸、强碱等有腐蚀性试剂，设专柜储存，使用时要带防护用具。 易燃易爆药品应存放于阴凉干燥处、通风良好，远离热源、火源、避免阳光直射。 严禁氧化剂和可燃物质一起研磨，物质放在一起。爆炸性药品应在低温处贮存，不得和其它易燃物质放在一起，移动时，不得剧烈震动。 稀释浓硫酸时，只能将浓硫酸慢慢到入水中，不能相反，必要时用水冷却。 做易燃液体的蒸馏、回收、回流、提纯操作要专人负责，远离明火，操作过程中不得离人，以防温度过高、或冷却水突然中断，周围不得放置化学药品。

开易挥发试剂瓶时，不准把瓶口对自己脸部或他人。不可直接用鼻子对着试剂瓶口辨认气味，如有必要，可将其远离鼻子，用手在瓶口上方扇动一下，使气味扇向自己辩认，绝不可用舌头品尝试剂。 取下正在沸腾的水或溶液时，须用烧瓶夹夹住摇动后取下，以防突然剧烈沸腾溅出溶液伤人。 腐蚀性药品洒在皮肤、衣物或桌面时，应立即用湿布擦干，然后用相应的弱酸、弱碱清洗，最后用清水冲洗。药品不慎沾在手上，应立即清洗，以免忘记，误食入体内。 微生物实验中一旦发生意外，如吸入菌液、划破皮肤、细菌污染实验台面或地面等处时，应立即说明及时处理。 每次微生物试验后，需用体积分数20ml/L的来苏液浸手或以肥皂洗手，再以清水冲洗。 化验使用过的废渣、废液应进行化学处理后方能倒掉。

误差是客观存在的 误差分类 ：根据误差产生的原因和性质将误差分为系统误差和偶然误差。 系统误差：又称可测误差，由化验操作过程中某些固定原因造成的。 具有单向性，即正负、大小都有一定的规律性，当重复进行实验分析时会重复出现。 若找出原因，即可设法减少到可忽略的程度。

系统误差 产生原因 方法：指化验方法本身造成的误差。如沉淀的溶解、反应不完全、指示剂终点与化学计量点不符合等。 仪器：由于使用的仪器本身不够精密所造成的。 试剂：由于试剂不纯或蒸馏水不纯，含有被测物或干扰物而引起的误差。 操作：由于化验人员对分析操作不熟练，对终点颜色敏感性不同、对刻度读数不正确等引起。 校正方法： 采用标准方法与标准样品进行对照试验； 校正仪器减小仪器误差； 采用纯度高的试剂校正试剂误差； 提高人员业务水平，减少操作误差。

偶然误差：随机的、不可避免的，呈正态分布又称随机误差，是由某些难以控制、无法避免的偶然因素造成的，其大小与正负都是不固定的。如操作中温度、湿度、灰尘等的影响都会引起分析数值的波动。 产生原因：操作中温度、湿度、灰分等的影响都会引起分析数值的波动。 减少偶然误差应重复多次平行实验并取平均值。 过失误差：操作人员的粗心大意或未按操作规程做，可避免。

微生物检验员证书



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【讲师介绍】

微生物检验员
食品化学微生物实验室
医疗器械行业申请GMP
化妆品行业

【培训对象】

1.企业主管食品质量、安全标准及监督管理工作岗位的人员、食品生产企业、经销单位、质量监督部门、卫生检验部门及有关科研、管理部门的管理人员、技术人员和检验人员。

更新时间：2024/3/20 9:12:39