【课程大纲】

什么是微生物检验员？

微生物检验员怎么获取？企业怎么获取微生物检验员证书？

非水溶性供试品 ：增加"十四烷酸异丙酯法"（如油溶膏剂等） 。 ●结肠溶制剂供试品 ：用pH7.6无菌磷酸盐 缓冲液溶解。 ●气雾剂、喷雾剂供试品：冷冻1小时，放尽抛射剂，药液加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨B.S。 ● 具抑菌活性的供试品：增加方法的可操作 性（细化）。

培养基及稀释剂等灭菌:采用验证合格 的灭菌程序进行灭菌。

稀释剂：pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲溶液（增 加检出率，对被破坏的微生物有复 苏作用） pH6.8无菌磷酸盐缓冲液 pH7.6无菌磷酸盐缓冲液

培养时间:必要时，可适当延长培养时间至5～7天 . ●点计：逐日点计. ●同稀释级两个平板的菌落平均数不小于15时，则两个平板菌落数不能相差1倍或以上。 ●培养基平板上生长特殊菌落：以菌落数高的培养基中的菌数为记数结果。 ●菌数报告规则：（1）、（2）、（3）、（4）。

一、微生物检验员证书颁发：

CCAA。

二、微生物检验员证书培训费用：

1480元，费用包含：培训费、资料费、证书费、快递费、发票。

食品微生物检验的采样方法

不同类型食品的分类 液体样品 原料：糖浆、果汁（浆）、调味原料、蜂蜜等； 成品：食用油、酱油、乳与乳制品、饮料、酒类等。 半固体样品 原料：椰浓缩浆、稀奶油、果酱、花生酱等； 成品：酸奶、果酱等。 固体样品 原料：肉类、奶粉、绝大多数添加剂、粮食谷物类等； 成品：速冻食品、肉制品、蜜饯类、蛋类等。

能采取最小包装的食品就采取完整包装，需拆包取样的应无菌操作。 不同类型的食品采样时采用不同的工具与方法。 液态食品：混匀后无菌开启包装后，用无菌注射器抽取于无菌盛样容器。 半固体食品：无菌拆包，用无菌勺子从几个部位挖取样品于无菌盛样容器。

固体食品：大块整体食品用无菌刀具和镊子从不同部位割取，兼顾表面与深部，注意样品的代表性；小块大包装食品应从不用部位的小块上切取置于无菌盛样器。 4. 冷冻食品：大包装小块食品按小块个体采取；大块冷冻食品用无菌刀削取样品或无菌小手锯锯取样品，也可用无菌钻头钻取碎屑样品于盛样容器。 固体食品与冷冻食品的采样需注意检验目的，若需检验污染情况，取表层；检验品质，取深部。

三、微生物检验员证书培训内容

1.检验的化学基础;

2.实验室安全知识;

3.实验室常用仪器讲解;

4.检验技术及微生物检验技术，大肠杆菌，菌落总数，无菌、药典、霉菌、酵母菌、金色葡萄球菌，志贺氏菌、溶血性链球菌、绿脓杆菌等菌种的实操视频。

四、微生物检验员证书培训相关

蛋白质 消化：样品中的含氮有机物经浓硫酸加热消化，硫酸使有机物脱水，有机物炭化生成C；C将硫酸还原为SO2，本身生成CO2；SO2使N还原为NH3，本身则氧化为SO3，而消化过程中生成的H，又加速了NH3的形成。在反应过程中，生成物水和SO3逸出，NH3则与硫酸结合成硫酸铵，留在溶液中。 蒸馏：硫酸铵在碱性条件下，释放出氨。 吸收和滴定：蒸馏过程中放出的氨用硼酸溶液吸收后，用硫酸标准溶液滴定，根据硫酸标准溶液消耗量计算出总氮量，进而算出蛋白质的含量。

蛋白质 注意事项 先小火加热，无泡沫后再加大火力。 10%的氢氧化钠每用3-4次要更换一次，并检查滤网是否堵塞。 蒸馏前检查水、硼酸、氢氧化钠、硫酸是否够用，加硫酸时试剂瓶内的细管不能拿出液面外，以防空气进入。 蒸馏过程中不能打开仪器门。 清洗完毕后用蒸馏水浸泡电极。 抽滤器空转不得超过5分钟。 消化好后及时蒸馏、滴定。

五、微生物检验员证书相关

误差是客观存在的 误差分类 ：根据误差产生的原因和性质将误差分为系统误差和偶然误差。 系统误差：又称可测误差，由化验操作过程中某些固定原因造成的。 具有单向性，即正负、大小都有一定的规律性，当重复进行实验分析时会重复出现。 若找出原因，即可设法减少到可忽略的程度。

系统误差 产生原因 方法：指化验方法本身造成的误差。如沉淀的溶解、反应不完全、指示剂终点与化学计量点不符合等。 仪器：由于使用的仪器本身不够精密所造成的。 试剂：由于试剂不纯或蒸馏水不纯，含有被测物或干扰物而引起的误差。 操作：由于化验人员对分析操作不熟练，对终点颜色敏感性不同、对刻度读数不正确等引起。 校正方法： 采用标准方法与标准样品进行对照试验； 校正仪器减小仪器误差； 采用纯度高的试剂校正试剂误差； 提高人员业务水平，减少操作误差。

偶然误差：随机的、不可避免的，呈正态分布又称随机误差，是由某些难以控制、无法避免的偶然因素造成的，其大小与正负都是不固定的。如操作中温度、湿度、灰尘等的影响都会引起分析数值的波动。 产生原因：操作中温度、湿度、灰分等的影响都会引起分析数值的波动。 减少偶然误差应重复多次平行实验并取平均值。 过失误差：操作人员的粗心大意或未按操作规程做，可避免。

3.半固体或粘性液体食品 : 融化（45℃水浴），小于15min，取样。

固体样品的处理 :捣碎均质法 ：将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g放入带225mL稀释液的无菌均质杯中，8000~10000r/min均质1~2min即可。

剪碎振摇法 ：将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g检样进一步剪碎，放入带225mL稀释液和直径5mm左右玻璃珠的稀释瓶中，盖紧瓶盖，用力快速振摇50次，振幅要大于40cm。
研磨法：将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g检样放入无菌钵中充分研磨后，再放入带有225mL无菌稀释液的稀释瓶中，盖紧盖后充分摇匀。
整粒振摇法：有完整自然保护膜的颖粒状样品(如蒜瓣、青豆等)，直接称取25g整粒样品置于带有225mL稀释液和直径5mm左右玻璃珠的稀释瓶中，盖紧瓶盖，用力快速振摇50次，振幅要大于40cm。
胃蠕动均质法：这是国外使用的一种新型的均质样品的方法，将一定量的样品和稀释液放入无菌均质袋中，开机均质。均质器有一个长方形金属盒，其旁安有金属叶板，可打击塑树袋，金属板由恒速马达带动，作前后移动而撞碎样品。。

品尝宗旨：观其色→闻其香→品其味→写评价 注意事项： 疲劳适应：如长时间持续一种刺激，则味觉及嗅觉都会变弱，导致知觉丧失的现象。 防止方法：1）限制每日品尝的样品数量；2）连续实验时，应先进行不易引起疲劳的实验；3）在判断样品的间隙应安排休息时间 对比效应：在味觉中第一种味使得第二种味变得更强或更弱一些的现象称为对比效应。如先尝一下淡盐水，然后再尝砂糖溶液就会感到更甜。 防止方法：漱口 变调效应：先吃食品的味使后吃食品的味发生变化的现象称为变调效应。如尝了盐水后就是尝普通没有任何甜味的水也会感到甜。 防止方法：品尝后应漱口，然后再进行下一次品尝。

根据天平的构造原理，又把天平分为机械天平和电子天平。 电子天平称量原理：电磁力平衡原理。 称量方法 直接称量法：直接将物品放入天平进行称量。 固定称量法：在天平上称出容器质量，清零后在容器中加入所需质量的样品。 减量称量法：先称取装有试样的称量瓶的质量，再称取倒出部分试样后称量瓶的质量，二者之差即为试样的质量。

天平的使用规则 天平室温度应保持稳定，室温应在15-30℃之间，湿度保持在55％-75％之间。 天平室要注意清洁、防尘。周围无震动和无强磁场。 天平接通电源后需要预热半小时以上，才能进行正式称量。 使用前检查天平是否水平，调整水平。 天平载重不得超过最大负荷。 挥发性、腐蚀性、吸潮性的物体必须放在加盖的容器中称量（液体样品称量时也应加盖）。 不得将过热或过冷的物体放在天平上称量。 天平罩内应放硅胶干燥剂，并及时更换。 称量时待显示稳定的零点后，将物品放到称盘上，关上防风门。显示稳定后读取称量值。 取放物品须轻缓。

微生物检验员证书



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【讲师介绍】

微生物检验员
食品化学微生物实验室
医疗器械行业申请GMP
化妆品行业

【培训对象】

1.企业主管食品质量、安全标准及监督管理工作岗位的人员、食品生产企业、经销单位、质量监督部门、卫生检验部门及有关科研、管理部门的管理人员、技术人员和检验人员。

更新时间：2024/3/31 12:51:01