【课程大纲】

什么是微生物检验员？

微生物检验员怎么获取？企业怎么获取微生物检验员证书？


操作环境 洁净度：微生物限度检查应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内进行。检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。 洁净度定期检测:单向流空气区域、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌、和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。

●细菌培养温度:30～35℃。 ●霉菌、酵母菌培养温度:23（25）～28℃。 控制菌培养温度:35～37℃ ●结果报告：以1g、1ml、10g、10ml 或 10cm2 为单位报告。

抽样量 ：随机抽取不少于检验量（两个以上最小包装单位）的3倍。 ● 检验量：一次试验所用的供试品的量。一般为10g或10ml；中药膜剂50 cm2，化学药膜剂为100cm2；贵重或微量包装的药品酌减（不得少于3g）。 ●检查沙门菌的供试品其检验量改为10g或10ml。从2个包装以上取样。

表面活性剂、中和剂或灭活剂：应证明其有效性及对微生物的生长和存活无影响。 ● 供试液从制备至加入检验用培养基，不得超过1小时。 ● 供试液制备若需用水浴加温时，温度不应超过45℃。 ● 供试液的体积：100ml。

供试品分类 液体供试品 固体、半固体或黏稠液性供试品 需用特殊供试液制备方法的供试品 非水溶性供试品 膜剂供试品 肠溶及结肠溶制剂供试品 气雾剂、喷雾剂供试品 具抑菌活性的供试品


一、微生物检验员证书颁发：

CCAA。 

二、微生物检验员证书培训费用：

1480元，费用包含：培训费、资料费、证书费、快递费、发票。 


1．取经37℃培养18-24小时，金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌、铜绿假单胞菌 10104肉汤培养物、 生孢梭菌 64941硫乙醇酸盐培养物1ml+9ml盐水10倍稀释至10-5 ~10-7为50~100个/ml，做活菌计数备用 2．取经25℃ 培养18~24小时的白色念珠菌霉菌液体培养物1ml+9 ml盐水10倍稀释至10-5 ~10-6为50~100个/ml，做活菌计数备用 3．取经25℃ 培养1周的黑曲霉菌斜面培养物，加3~5ml盐水洗下霉菌孢子，吸取出菌液， 用标准比浊管比浊，与浊度相当后，取1 ml +9 ml盐水=10-1，逐管10倍稀释为10-4约50~100个/ ml，做活菌计数备用

结果判断：供试品组的菌回收率、稀释剂对照组的菌回收率。 试验组的菌回收率=[（试验组平均菌落数–供试品对照组平均菌落数）/菌液组平均菌落数 ]×100% 稀释剂对照组的菌回收率=[（稀释剂对照组的平均菌落数/菌液组的平均菌落数）]×100% ●判断标准: 菌回收率均不低70% 。

试验菌株：按规定检查的控制菌选择相应验证的菌株。 ●阴性对照菌株:设立阴性对照菌是为了验证该控制菌检查方法的专属性。金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、梭菌用大肠埃希菌；大肠埃希菌、沙门菌、大肠菌群用金黄色葡萄球菌。 ●菌种的要求：不得超过5代。采用适宜的方法保存。 ●菌液制备:10～100cfu/ml。


三、微生物检验员证书培训内容

1.检验的化学基础;

2.实验室安全知识;

3.实验室常用仪器讲解;

4.检验技术及微生物检验技术，大肠杆菌，菌落总数，无菌、药典、霉菌、酵母菌、金色葡萄球菌，志贺氏菌、溶血性链球菌、绿脓杆菌等菌种的实操视频。 

四、微生物检验员证书培训相关


样品的送检 ：采集好的样品及时送到检验室。 一般不超过3h；路途要遥远时，不需冷冻的样品置于1-5 ℃环境中，切勿冻结；需保持冷冻状态的样品保存于泡沫塑料隔热箱内，防止反复冷冻和溶解

2. 样品送检时认真填写申请单，供检测人员参考。

3. 拿到送检单后，检验人员应立即登记，填写序号，并按要求将样品置于冰箱或冰盒中。

4. 微生物检验室必须备有专用冰箱存放样品。

一般阳性样品存放3d；进口阳性样品存放6个月；阴性样品及时处理。


五、微生物检验员证书相关


b、禽类（包括家禽和野禽） 鲜、冻家禽采取整只，放无菌容器内；带毛野禽可放清洁容器内，立即送检。 c、各类熟肉制品 包括酱卤肉、肴肉、方圆腿、熟灌肠、熏烤肉、肉松、肉脯、肉干等，一般采取200g，熟禽采取整只，均放无菌容器内，立即送检。 d、腊肠、香肚等生灌肠 采取整根、整只，小型的可采数根、数只，其总量不少于250g。

检样的处理 a、生肉及脏器检样的处理 先将检样进行表面消毒（在沸水内烫3s~5s，或灼烧消毒），再用无菌剪剪取检样深层肌肉25g，放入无菌乳钵内用灭菌剪剪碎后，加灭菌海砂或玻璃砂或玻璃砂研磨，磨碎后加入灭菌水225mL，混匀后即为1:10稀释液。 b、鲜、冻家禽检样的处理 先将检样进行表面消毒，用灭菌剪或刀去皮后，剪取肌肉25g（一般可从胸部或腿部剪取），以下处理同生肉。带毛野禽去毛后，同家禽检样处理。

棉拭采样法和检样处理 一般用板孔5cm2的金属制规板，压在受检物上，将灭菌棉拭稍沾湿，在板孔5cm2的范围内揩抹多次，然后将板孔规板移压另一点，用另一棉拭揩抹，如此共移压揩抹10次，总面积50cm2。每支棉拭在揩抹完毕后立即剪断或烧断后投入盛50ml灭菌水的三角瓶或大试管中，立即送检。检验时充分振摇瓶、管中液体，作为原液，再作10倍递增稀释。 检验致病菌，不必用规板，在可疑部位用棉拭揩抹即可。 4、检验方法 见菌落总数、大肠菌群测定及有关致病菌和霉菌的检验。



冷冻样品的处理 ：冷冻样品，先将中样在0~4 ℃下解冻，时间不能超过18h，或在 45 ℃下解冻，时间不能超过15min。再取检样25g做稀释处理。样品的稀释：液体样品：倍比稀释，20min内完成稀释。

小颗粒固体样品：均质后倍比稀释，以30cm的幅度摇动25次，20min内完成稀释。
粉末或软块样品：拍击式均质30s，脂肪浓度高的样品90s，过程不会引起温度升高，20min内完成稀释。
表面样品：倍比稀释，20min内完成稀释。




三级法有n、c、m及M值。M即附加条件后判定合格的菌数限量。 设有微生物标准m及M值两个限量，超过m值的检样，即算为不合格品。其中以m值到M值的范围内的检样数，作为c值，如果在此范围内，即为附加条件合格，超过M值者，则为不合格。 例如：冷冻生虾的细菌数标准 n=5，c=3，m=102CFU/g，M=103CFU/g，其意义是从一批产品中，取5个检样，经检样结果，允许≤3个检样的菌数是在m～M值之间，如果有3个以上检样的菌数是在m～M值之间或一个检样菌数超过M值者，则判定该批产品为不合格品。 对健康危害低的情况下建议使用三级抽样方案

随机抽样，就是保证在抽取样本过程中，排除一切主观意向，使批中的每个单位产品都有同等被抽区的机会的一种抽样方法。 在现场抽样时，可利用随机抽样表进行随机抽样。随机抽样表系用计算机随机编制而成，包括一万个数字。 其使用方法如下：a先将一批产品的各单位产品（如箱、包、盒等）按顺序编号。如将一批600包的产品编为1、2……600。b.随意在表上点出一个数。c.根据单位产品编号的位数进行抽样。重复抽样，直到完成应抽样品件数为止。


微生物检验员证书



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【讲师介绍】

微生物检验员
食品化学微生物实验室
医疗器械行业申请GMP
化妆品行业

【培训对象】

1.企业主管食品质量、安全标准及监督管理工作岗位的人员、食品生产企业、经销单位、质量监督部门、卫生检验部门及有关科研、管理部门的管理人员、技术人员和检验人员。

更新时间：2024/3/9 11:07:27